Cum se comanda oligonucleotidele

Sinteza oligonucleotide ADN

  • lungime de pana la 200 bp
  • domeniu standard (40 nmol, 200 nmol and 1 μmol)
  • domeniu larg de modificari
  • fara saruri
  • posibilitate de purificare HPLC si PAGE
Fluorofory Ex. Em. Optiune
Cy3TM 550 564 ATTO 542, DY-530
Cy5TM 648 668 ATTO 647N
FAM 495 520 DY-490, DY-495
HEX 538 555 CAL Fluor® Orange 560
JOE 529 555 CALFluor® Gold 540, Orange 560
ROX 588 608 ATTO Rho 101
TAMRA 559 583 CAL Fluor® Red 590, DY-560
TETTM 522 539 CAL Fluor® Gold 540
Texas Red® 596 613 CALFluor® Red 610, ATTO Rho101

Sinteza oligonucleotide ARN

  • lungime de pana la 60 bp
  • domeniu standard (40 nmol, 200 nmol si 1 μmol)

Sinteza oligonucleotide LNA

Locked nucleic acids (LNA) sunt nucleotide ARN modificate ce contin o jumatate zaharica ciclica "blocata". Puntea dintre oxigenul 2' si carbonul 4' "blocheaza" riboza in conformatia 3'-endo.  Nucleotidele LNA pot fi amestecate cu ADN sau ARN rezidual in oligonucleotide. Oligonucleotidele LNA modificate prezinta o afinitate inalta catre hibridizare ADN complementar sau ARN.

De ce se utilizeaza LNA?

  • acord fin al temperaturilor de topire
  • afinitate avansata de hibridizare la lungimi scurte
  • raport semnal zgomot imbunatatit in testele qPCR
  • cuantificare mai precisa a genelor si separare alelica
  • detectie mai buna a neconcordantelor mononucleotidelor
  • rezistenta endo- si exonucleaza crescuta

Aplicatii

  • Aplicatii qPCR/PCR inclusiv multiplex PCR
  • inactivare a genelor cu oligonucleotide antisens LNA
  • dezvoltare medicamente antisens (non-toxic)
  • discriminare alele
  • analize microarray
  • analiza expresie gene

Indrumari Design

  • nu recomandam mai mult de 4 baze consecutive LNA
  • bazele LNA nu trebuie pozitionate la terminalul 3´sau aproape de acesta
  • incercati sa evitati intinderi 3 +G si 3 +C
  • continutul de GC trebuie sa fie intre 30-60 %
  • un numar mare de LNA (de ex. 16 sau mai multe) creste riscul de autohibridizare
  • o baza LNA creste Tm cu 2-6°C (DNA) si 3-9°C (RNA)
  • o baza LNA pozitionata la terminatia 5´ nu influenteaza Tm

Cum se comanda

  • LNA se marcheaza in secventa cu + (e.g. +A, +C, +G, +T)
  • disponibile in toate domeniile standard (40 nmol, 200 nmol si 1 μmol)
  • compatibile cu toata gama noastra de modificari